GeneHero? CRISPR 人類 sgRNA 文庫

復(fù)能基因為您提供 CRISPR sgRNA 文庫，用于高通量敲除特定或者客戶指定的人類基因族基因或通路基因。通過基因敲除實現(xiàn)的功能缺失型篩選是哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)基因分析、促進基因研究、基因組級別功能調(diào)查（如信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路）以及藥物研究（如靶標(biāo)甄別和藥物機制研究）的強大工具。

產(chǎn)品優(yōu)勢

    每個 sgRNA 文庫克隆都是單獨構(gòu)建，經(jīng)過測序驗證后再混合，以保證文庫的質(zhì)量及對目的基因家族的 sgRNA 表現(xiàn)度。

    可提供預(yù)制或定制 sgRNA 文庫。

    每個目的基因設(shè)計2條或更多 sgRNA。sgRNA克隆

    多種產(chǎn)品規(guī)格可供選擇，如慢病毒顆?；旌衔膸臁⑥D(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA混合文庫或菌種混合文庫。

GeneHero? 人類 sgRNA 文庫使用慢病毒載體，可通過兩種不同方法（直接轉(zhuǎn)染或包慢病毒顆粒后轉(zhuǎn)導(dǎo)）實現(xiàn)大規(guī)模功能篩選。對于每個目的基因，我們會至少設(shè)計2個sgRNA 分別靶向基因的不同序列區(qū)（極少數(shù)基因由于序列限制只能設(shè)置1條 sgRNA）。這些 sgRNA 序列都經(jīng)過設(shè)計優(yōu)化及測序驗證，確保高效的基因敲除。您可以選擇訂購分別針對不同基因家族的標(biāo)準(zhǔn)混合文庫，或根據(jù)您的實驗需要定制屬于您的文庫組合。文庫目前提供慢病毒顆粒、轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒 DNA 以及菌種等三種形式。它們能轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)導(dǎo)多種細(xì)胞系，包括 Cas9 核酸酶穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系。

圖 1. 使用 sgRNA 文庫進行大規(guī)模篩選的示意圖

產(chǎn)品應(yīng)用

    使用大量 sgRNA 分別或混合進行高通量基因敲除篩選

    藥物靶標(biāo)研究（圖2）

    表型篩選

    綜合致死性篩選

圖 2.  GeneHero? sgRNA 文庫應(yīng)用流程。 A：混合文庫篩選。對感染了sgRNA混合文庫的細(xì)胞株進行篩選，獲取具備目的表型的陽性細(xì)胞株進行Sanger測序識別對應(yīng)的sgRNA，或通過深度測序搜索比例過高或過低的sgRNA。B：使用 sgRNAs 文庫array（獨立克隆文庫）進行基因敲除篩選。各板孔里的細(xì)胞株分別感染不同的sgRNA慢病毒顆粒，并篩選具備目的表型的陽性細(xì)胞株。如此無需測序即可獲知與目的表型相關(guān)的sgRNA。

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CRISPR-Cas9 產(chǎn)品與服務(wù)

? Cas9蛋白

大腸桿菌表達(dá)的Streptococcus pyogenes（釀膿鏈球菌）Cas9蛋白。Cas9蛋白具有核定位序列（NLS），兩種類型可選，不帶標(biāo)簽/C-端帶6×His標(biāo)簽。

? GeneHero? Cas9 預(yù)制穩(wěn)轉(zhuǎn)株

提供 Cas9 核酸酶的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系，為您的 CRISPR 基因組編輯應(yīng)用提供一個方便、高效的工具。

? GeneHero? CRISPR-Cas9 產(chǎn)品與服務(wù)

RNA導(dǎo)向的精確、靈活的基因組編輯工具。

預(yù)制穩(wěn)轉(zhuǎn)株

? GeneHero? CRISPRi 預(yù)制穩(wěn)轉(zhuǎn)株

為dCas9-KRAB穩(wěn)定表達(dá)的單克隆細(xì)胞株，是研究基因表達(dá)抑制和基因篩選的理想方法。

? GeneHero? CRISPRa 預(yù)制穩(wěn)轉(zhuǎn)株

為dCas9-VP64/MPH基因穩(wěn)定表達(dá)的單克隆細(xì)胞株，是研究基因表達(dá)激活和基因篩選的理想方法。

sgRNA 文庫

? GeneHero? sgRNA 文庫

通過基因敲除實現(xiàn)功能缺失型篩選，是哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)基因分析、促進基因研究、基因組級別功能調(diào)查（如信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路）以及藥物研究（如靶標(biāo)甄別和藥物機制研究）的強大工具。

啟動子報告克隆

? GLuc-ON? 啟動子報告克隆

可以通過觀察熒光素酶的活性來研究啟動子對基因的調(diào)節(jié)作用。